М.И. Кокшаров, Д.В. Смирнова, С.Г. Аббасова, Н.Н. Угарова

Гибридный белок: люцифераза Luciola мingrelica–биотин-связывающий домен. Получение, свойства, применение

Методами генетической инженерии сконструирована плазмида, кодирующая ген гибридного белка, который включает ген термостабильного мутанта люциферазы светляков Luciola mingrelica (4TS) и ген, кодирующий 87 С-концевых аминокислотных остатков биотин-связывающего домена E. coli (bccp87). Установлено, что при наработке гибридного белка (4TS-bccp) в клетках E. coli BL21(DE3) 60% целевого белка образуется в биотинилированной форме. Показано, что каталитические свойства, термостабильность и спектры биолюминесценции гибридного белка близки к свойствам исходной люциферазы. Показана возможность использования комплекса гибридного белка со стрептавидином в иммуноферментном анализе для определения содержания клеток Salmonella typhimurium в интервале от 10⁴ до 5·10⁶ КОЕ/мл.

  Полный текст статьи в формате PDF

Вестник Московского Университета.
Химия 2011, том 52, № 4, стр. 291-297