ChemNet
 
Вестник Московского Университета, серия "Химия"
Предыдущая статья Следующая статья Содержание  

Н.Н. Угарова

Стабилизация люциферазы светляков Luciola mingrelica методами генетической инженерии

Реферат

Дан краткий обзор результатов по стабилизации люциферазы светляков Luciola mingrelica методами генетической инженерии. Методом сайт-специфического мутагенеза Cys62,146,164Ser получены мутантные ферменты с повышенной термостабильностью и меньшей зависимостью от добавок дитиотреитола. Получен двойной мутант G216N, A217L, термостабильность и устойчивость к ДМСО которого были в несколько раз выше, чем WT-люциферазы. Случайный мутагенез участка гена, кодирующего остатки 1-225, и скрининг мутантов позволили получить более термостабильный, чем WT-люцифераза, мутант МТ8 и более устойчивые к диметилсульфоксиду мутанты MT3, MT4. Методом направленной эволюции участка гена, кодирующего остатки 130-390, после 4 циклов мутагенеза получен мутант 4TS, содержащий 8 замен, удельная активность которого по сравнению с WT-люциферазой возросла в 2 раза, значение Km по АТФ уменьшилось в 8 раз, а стабильность при 42°C увеличилась в 65 раз. Обсужденмеханизмстабилизацииданногомутанта.

  Полный текст статьи в формате PDF

Вестник Московского Университета.
Химия 2010, том 51, № 3, стр. 168-173


Copyright (C) Химический факультет МГУ, 2010


Сервер создается при поддержке Российского фонда фундаментальных исследований
Не разрешается  копирование материалов и размещение на других Web-сайтах
Вебдизайн: Copyright (C) И. Миняйлова и В. Миняйлов
Copyright (C) Химический факультет МГУ
Написать письмо редактору